品牌：Meiluncell

產品介紹：

meiluncell GMP級無蛋白非程序細胞凍存液采用滲透性保護劑、非滲透性保護劑、細胞沉降穩(wěn)定劑、細胞膜保護劑組合的方案對細胞進行全方位低溫保護，可使凍存過程中溶液冰點降低，提高細胞膜對水的通透性，使細胞內水分在凍結前透出細胞，防止或減少冰晶對細胞的損傷，同時降低冰凍時細胞周圍電解質濃度，避免電解質損傷，還可以延緩凍存過程中細胞的互相擠壓，保護細胞膜，從而有效提高細胞復蘇率和活力。

傳統(tǒng)的細胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合，因其中的血清成分復雜、批次差異大等缺點，其應用具有局限性，且需要采用程序性降溫的凍存方法，費時費力。meiluncell®GMP級無蛋白非程序細胞凍存液是一款Serum-Free、Animal Origin-Free、Protein-Free、Chemically Defined，不需要程序性降溫的凍存液。與傳統(tǒng)細胞凍存液相比具有明顯優(yōu)勢（表1），凍存細胞復蘇后的存活率也有明顯提高（詳情請見產品數據展示）。

meiluncell GMP級無蛋白非程序細胞凍存液推薦用于各種常規(guī)哺乳動物細胞的凍存，尤其適合于無血清培養(yǎng)的干細胞、免疫細胞、蛋白表達細胞的凍存。

表1：傳統(tǒng)細胞凍存液和meiluncell GMP級無蛋白非程序細胞凍存液的特點比較

生產工藝：本產品使用注射用水（Water-For-Injection）配制，生產程序嚴格按照cGMP管理規(guī)定，并在體外診斷試劑備案凈化車間中完成。 公司已取得ISO9001:ISO13485質量體系認證。

質控體系：Meiluncell GMP級凍存液，生產研發(fā)質控嚴格按照gmp標準執(zhí)行，產品取得醫(yī)療器械備案，（備案號蘇蘇械備20210235），并進行了小鼠全身急毒實驗，兔溶血性實驗等臨床毒理研究，表明本品安全可靠，CDE藥用輔料登記進行中，可提供完整的工藝，質量，毒理研究數據，符合臨床監(jiān)管要求，純化學成分，內毒素水平低于注射液國家標準，可以最大程度加快客戶臨床實驗進程，歡迎聯合申報。

產品優(yōu)勢：

Ø 安全——無血清，無動物源成分，無蛋白，化學成分明確。

Ø 高效——有效提高細胞復蘇存活率，大部分細胞（包括間充質干細胞）復蘇率可達90%以上。

Ø 穩(wěn)定——不影響干細胞表型和生長狀態(tài)，且可維持干細胞的多分化性。

Ø 便捷——即用型產品，且無需程序性降溫，可直接-80℃過夜后轉移至液氮中長期保存。

Ø 質優(yōu)——嚴格的質量控制，產品性能媲美進口；原料均選用自產或者經過嚴格檢測和純化的低內毒素高純藥用級別原料；注射用水配置，符合GMP規(guī)定生產，工藝穩(wěn)定，批差異小。進口材質無菌包裝瓶，符合GMP管理規(guī)定，優(yōu)秀的密閉性及內部涂層保護，極大的保證了產品的穩(wěn)定性。

Ø 可靠——已有干細胞、免疫細胞、腫瘤和轉化細胞系等多種細胞的凍存應用。

產品包裝形式： 100ML每瓶。

保存條件：2~8℃保存。

運輸條件：常溫運輸。

有效期：12個月。

產品數據展示：

1. 細胞復蘇存活率

l meiluncell®GMP級無蛋白細胞凍存液組與進口C品牌無血清凍存液組在大部分細胞上存活率是相當的，在有些細胞上meiluncell®GMP級無蛋白細胞凍存液組的存活率更高（圖1&2）。

圖1: 用meiluncell®GMP級無蛋白細胞凍存液、進口C品牌無血清凍存液、程序性凍存液（20%FBS+10%DMSO）在-80℃中凍存3-17天的多種細胞復蘇后存活率比較。

圖2: 用meiluncell®GMP級無蛋白細胞凍存液、進口C品牌無血清凍存液、程序性凍存液（20%FBS+10%DMSO）在-80℃凍存3個月的多種細胞復蘇后存活率比較。

2. 間充質干細胞復蘇后貼壁情況

l 細胞復蘇后將細胞數調整至1×10^5/ml，UC-MSC用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)，BM-MSC用DMEM-L+10%FBS培養(yǎng)，24h后換液并觀察細胞貼壁情況。meiluncell®GMP級無蛋白細胞凍存液組比進口C品牌無血清凍存液組貼壁部分細胞更多（圖3），凍存后不會影響間充質干細胞的貼附能力。

圖3: 用meiluncell®GMP級無蛋白細胞凍存液、進口C品牌無血清凍存液、程序性凍存液（20%FBS+10%DMSO）凍存間充質干細胞復蘇后細胞貼壁情況的比較。

3. 細胞復蘇后生長狀態(tài)

l 細胞復蘇后培養(yǎng)48h，觀察生長情況。meiluncell®GMP級無蛋白細胞凍存液組與進口C品牌無血清凍存液組相比，細胞狀態(tài)相當甚至更好（圖4），凍存后不會影響間充質干細胞和其他貼壁細胞的生長。

圖4: 用meiluncell®GMP級無蛋白細胞凍存液、進口C品牌無血清凍存液、程序性凍存液（20%FBS+10%DMSO）凍存間充質干細胞和其他細胞系復蘇后細胞生長狀態(tài)的比較。

4. 對間充質干細胞標志物表達的影響

l 細胞復蘇并傳代兩次后通過流式細胞術評估細胞標志物的表達。meiluncell®GMP級無蛋白細胞凍存液組能夠維持CD105和CD90的陽性表達，和CD45陰性，沒有觀察到與程序性凍存液組標志物表達的差異（圖5）。

圖5: 用meiluncell®GMP級無蛋白細胞凍存液、程序性凍存液（20%FBS+10%DMSO）凍存人臍帶間充質干細胞復蘇后細胞標志物的表達。

5. 對間充質干細胞分化潛能的影響

l meiluncell®GMP級無蛋白細胞凍存液凍存的細胞保留了三系分化潛能，成脂肪分化細胞形成可見的脂質空泡，呈現出典型的成脂分化；成骨分化細胞形成大量的鈣結節(jié)，呈現典型的成骨分化；軟骨細胞球體的切片和染色證明了硫酸軟骨素和硫酸膠質等蛋白的存在，呈現典型的成軟骨分化（圖6）。

圖6: 用meiluncell®GMP級無蛋白細胞凍存液凍存的人臍帶間充質干細胞分化潛能的鑒定。將復蘇后的MSC分化成（A）脂肪細胞、（B）骨細胞和（C）軟骨細胞，分別用（A）油紅O，（B）茜素紅和（C）阿利新藍進行染色。