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大腸桿菌(E.coli)表達系統服務

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服務介紹:
重組蛋白表達技術可用于多種下游應用,包括基因調控分析、蛋白結構及功能分析、蛋白質間相互作用分析等。我們可提供基于原核、酵母、昆蟲桿狀病毒、哺乳動物細胞等多種蛋白表達系統的蛋白定制服務。
原核表達系統是通過原核生物來獲得外源蛋白的體系。原核表達是目前常用的重組蛋白表達方式之一,操作相對簡便,要求較低。相對哺乳動物表達系統更加經濟節約。
服務優勢:

1、美侖生物擁有豐富的大腸桿菌可溶性蛋白表達、純化及蛋白變復性經驗。

2、我公司擁有多種E. coli細胞株和表達載體,滿足特定蛋白質胞內表達及周質空間分泌表達需求。也可利用SUMO、GST、Trx及NusA等促融標簽解決蛋白自身疏水性造成不可溶表達問題。提供從密碼子優化到重組蛋白表達、純化的一站式服務以及標簽去除、內毒素去除等附加服務,以滿足不同的定制需求。

3、針對于有些外源基因在大腸桿菌中重組表達會形成膜包裹的高密度、不溶性蛋白質的包涵體的情況,我們會進行表達系統優化,盡量降低形成包涵體的幾率。

4、我們會通過評估確定復性條件,進行溫和的包涵體變復性。

5、我們提供的復性蛋白純度在95%以上。對于客戶要求切除標簽的情況,我們可以做到切標簽不留殘基。

6、我們具有特色的低溫誘導表達體系,提高了蛋白可溶表達幾率,增加了表達成功和蛋白產物的活性概率。可為客戶提供優質的原核蛋白表達服務。

7、可進行大規模生產。

8、具有完備的檢測平臺,如Elisa(酶聯免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝膠電泳、Western Blot(蛋白質免疫印跡)等檢測平臺,可對蛋白的濃度、純度、活性等多項性能進行評估。

9、我們實行專人專項管理制度,即在整個項目期間,每個不同的實驗階段,都有相關人員與客戶進行對接,始終保持與客戶間的溝通,保證項目進展的透明化。

10、通過分步報價、按節點收費的方式,全面降低客戶的風險,極大程度上節約了客戶的成本。

服務內容:

主要流程

時間

內容

交付內容

基因合成及密碼子優化

1-2周

客戶提供目的蛋白的序列信息或質粒。

 

載體構建

1-2周

1.克隆至合適的表達載體(可選擇的表達載體以pET和pGEX系列為主)
2.質粒測序
3.質粒制備

測序報告(若客戶要求)

表達鑒定及可溶性分析

1-2周

1.10mL培養
2.3個表達條件嘗試
3.表達菌株的選擇
4.蛋白表達評估 (SDS-PAGE)

表達評估報告

放大表達和1-2步純化

1-2周

1.蛋白純化 (可溶表達)
2.蛋白變性復性純化 (包涵體)
3.QC分析 (SDS-PAGE,UV等)

1.0.5-1mg純化蛋白樣品
(如蛋白表達可行)
2.質量檢驗報告 (CoA)

大量表達及純化(可選)

2-8周

1.100mg或更多蛋白
2.QC檢測

1.純化蛋白
2.質量檢驗報告 (CoA)

附加項訂購信息

時間

內容

交付內容

蛋白去內毒素

1-2周

去除蛋白內毒素

質量檢測報告(CoA)

2022年3月30日 11:36
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